PATRÓN DE EXPRESIÓN INTRAHEPÁTICO DE LA CICLOOXIGENASA-2 EN LA INFECCIÓN CRÓNICA POR EL VIRUS C: PAPEL PATOGÉNICO EN FIBROGÉNESIS Y CARCINOGÉNESIS

Autor: NÚÑEZ MARTINEZ OSCAR
Año: 2003
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA
Centro de lectura: MEDICINA
Director: CLEMENTE RICOTE GERARDO
Tribunal: PORTUGAL ALVAREZ JOSE DE , CUERVAS-MONS MARTINEZ VALENTIN , SÁNCHEZ TURRION VICTOR , MATA GARCÍA MANUEL DE LA , CASTELLANO TORTAJADA GREGORIO
Resumen de la tesis

La Ciclooxigenasa (COX) es la enzima encargada del a biosíntesis de las PG. Su información inducible, denominada COX-2, ha sido implicada en múltiples procesos patológicos como inflamación, fibrogénesis y carcinogénesis. Diferentes autores han descrito que el aumento de la expresión intrahepática dela COX-2 y de la producción de PG podría contribuir a la lesión hepática y a la aparición de hepatocarcinoma (CHC). En nuestro medio la infección por el virus de la hepatitis C (VHC) es una causa importante de hepatitis crónica (HC), cirrosis hepática (CH) y CHC, y por tanto de una morbi-mortalidad significativa. Los objetivos principales de este trabajo de Tesis Doctoral han sido valorar la expresión y localización de la COX-2 en la HC por VHC y su relación con la gravedad de la lesión hepática. Otros objetivos analizados han sido comparar la expresión de la COX-2 en la HC por VHC con la hepatopatía alcohólica, la expresión y relación de las MMPs con la COX-2, en la infección crónica por el VHC, y la valoración de la asociación entre los niveles de expresión intrahepática de la COX-2 con las características clínicas, bioquímicas, virológicas e histológicas de los pacientes con infección crónica por el VHC. Se han estudiado 51 pacientes, de los cuales 32 tenían una infección crónica por el VHC (5 con CH), 9 una hepatopatía alcohólica (6 con CH) y 10 pacientes como grupo control compuestos de 4 pacientes con hígado histológicamente normal y 6 con esteatosis hepática no alcohólica. Para determinar la COX-2 en muestras de tejido hepático se realizaron técnicas de Western Blot, RT-PCR y de inmunohistoquímica. Además se determinó la producción de PG por técnicas de ELISA para valorar la funcionalidad de la enzima. También se estudió mediante Western Blot la expresión intrahepática de MMP-2 y MMP-9 y la actividad de la MMP-9 con un ensayo específico. El análisis por Western Blot de la COX-2 en nuestras de biopsia hepática de pacientes con infección crónica por el VHC demostró un aumento significativo de su expresión en todos los grupos histológicos estudiados respecto al grupo control. Hay que destacar el hecho del incremento progresivo de los niveles de expresión intrahepática de la COX-2 en relación con la gravedad de la lesión histológica, presentando el mayor de expresión en la CH. La determinación del ARNm de la COX-2 por RT-PCR confirmó el patrón de expresión observado a nivel de la proteína. Este incremento de la expresión de la COX-2 se acompañó de un aumento de la concentración intrahepática de PG, que fue máxima en la HCG y en la CH, lo que demuestra que la expresión intrahepática de la COX-2 es funcional en estos pacientes. Posteriormente se procedió valorar mediante estudio inmunohistoquímico la localización intrahepática de la COX-2. De esta manera se observó que la COX-2 se expresaba en el citoplasma de hepatocitos en la HCG y en la CH por la VHC, mientras que en la HCL por el VHC, en la esteatosis alcohólica y en el grupo control la expresión de la COX-2 se restringía a las células mononucleares y del endotelio sinusoidal. Un hecho interesante es que el patrón de expresión intrahepático de la COX-2 fue similar en la CH tanto de etiología vírica como alcohólica. Uno de los datos más interesante de este trabajo de Tesis Doctoral fue que el nivel de expresión intrahepático de las MMP2- y MMP-9, así como la actividad intrahepática de MMP-9, estaban significativamente aumentadas en los pacientes con infección crónica por el VHC respecto al grupo contro, mostrando una correlación positiva con la gravedad del daño hepático, y de forma paralela al patrón de expresión intrahepático de la COX-2 en estos pacientes. No se demostró relación entre los niveles de expresión intrahepático de COX-2 con la edad y el sexo de los pacientes, los niveles de transaminasas, el genotipo y carga virales, ni con el grado necroinflamatorio en la biopsia hepática. Por el contrario, se determinó una asociación de los niveles de expresión intrahepática de la COX-2 con el estadio de fibrosis hepática. Los resultados obtenidos en esta Tesis Doctroal indican que la COX-2, mediante la producción intrahepática mantenida de cantidades significativamente elevadas de PG y de la MMP-2 y MMP-9, juega un importante papel en la figrogénesis y, probablemente, en la carcinogénesis hepática relacionada con la infección crónica por el VHC.
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