ESTUDIO DE LA EXPRESIÓN DEL GEN CYP19 (AROMATASA) EN OSTEOBLASTOS HUMANOS IN VITRO Y BÚSQUEDA DE NUEVOS POLIMORFISMOS RELACIONADOS CON LA OSTEOPOROSIS

Autor: ENJUANES GUARDIOLA ANA
Año: 2003
Universidad: BARCELONA
Centro de realización: UB
Centro de lectura: BIOLOGÍA
Director: DÍEZ PÉREZ ADOLFO
Tribunal: GONZÁLEZ MACÍAS JESÚS , MESSEGUER NAVARRO ANNA , NOLLA SOLÉ JOAN MIQUEL , MARIÑOSO BARBA LUISA , VILAGELIU ARQUES LLUISA
Resumen de la tesis

La osteoporosis postmenopáusica se relaciona claramente con el déficit estrogénico que se produce con la pérdida de la función ovárica en la mujer tras la menopausia. Además, en los últimos años, se ha observado que la biosíntesis extragonadal de estrógenos ejerce una importante función sobre el metabolismo óseo, tanto en mujeres postmenopaúsicas como en varones. Así, la expresión de aromatasa por parte de las células óseas podrían determinar la concentración local de estrógenos en el tejido óseo, y por lo tanto, jugar un papel muy importante tanto en la osteoporosis postmenopáusica como en la osteoporosis masculina. Por este motivo, se ha estudiado la capacidad de síntesis de estrógenos por parte del tejido óseo y su regulación por distintas hormonas y citocinas. Se ha observado que los osteoblastos humanos normales in vitro expresan el gen CYP19 en condiciones no estimulantes. La dexametasona incrementa la expresión del gen CYP19 en osteoblastos humanos normales in vitro y la presencia de suero tiene un efecto sinérgico sobre este efecto estimulador. En la línea celular de osteosarcoma MG-63 la dexametasona sólo incrementa la expresión del gen CYP19 en presencia de suero. La vitamina D incrementa la expresión del gen CYP19 en osteoblastos humanos normales in vitro y en las cuales MG-63. Esta estimulación es inhibida por la presencia de FCS. La testosterona y el 17beta-estradiol incrementan la expresión del gen CYP19 en osteoblastos humanos normales in vitro, siendo de mayor magnitud el efecto de la testosterona. Esta estimulación es inhibida por el FCS. En cambio, estos dos tratamientos no afectan la expresión del gen en la lína celular MG-63. La IL-1beta no afecta la expresión del gen CYP19 en osteoblastos humanos normales in vitro ni en la línea celular MG-63. El TNFalfa inhibe la expresión del gen CYP19 en osteoblastos humanos normales in vitro, tanto en ausencia como en presencia de FCS. En cambio, no afecta la expresión del gen en la línea celular MG-63. Los osteoblastos humanos normales in vitro expresan los dos receptores de la leptina, el OB-Rs y el OB-Rl. La leptina no afecta la expresión del gen CYP19 en estos osteoblastos ni en la línea celular MG-63. Los promotores I.4, I.2, I.3 y pII del gen CYP19 son los que median la expresión de este gen en osteoblastos humanos in vitro. El promotor I.4 se utiliza en los osteoblastos cultivados en condiciones basales y bajo los tratamientos con dexametasona, vitamina D, testosterona, 17beta-estradiol, IL-1beta o TNFalfa. El promotor I.3 se utiliza en los osteoblastos cultivados en condiciones basales, con dexametasona y/o con vitamina D. El promotor I.2 se utiliza en los osteoblastos tratados con dexametasona o testosterona. El promotor pII se utiliza principalmente en los osteoblastos tratados con FCS o con IL-1beta. Los promotores I.1 y I.6 del gen CYP19 no son utilizados en osteoblastos humanos in vitro bajo ninguno de los tratamientos con FCS, dexametasona, vitamina D, testosterona, 17beta-estradiol, IL-1beta o TNFalfa. La región promotora I.4 más el exón I.4 median la estimulación por dexametasona en osteoblastos humanos, siendo el exón I.4 relevante para esta estimulación. La región promotora I.3 más el exón I.3 median la estimulación por vitamina D y la presencia del exón I.3 es importante para que esta estimulación se produzca. El promotor pII puede tener una gran actividad transcripcional en osteoblastos humanos, aunque es inhibida o reprimida por la secuencia situada a 5' y comprendida entre las posiciones -221 y -867. El promotor I.6 muestran una actividad transcripcional muy baja en osteoblastos humanos y no responde a ninguno de los tratamientos con FCS, dexametasona, vitamina D, testosterona, 17beta-estradiol, IL-1beta o TNFalfa. Finalmente, se han identificado dos nuevos polimorfismos en la región promotora del gen CYP19 (-790 G/A y -909 A/C), que se han denominado Aro1 y Aro2. El polimorfismo Aro1 está asociado con la densidad mineral ósea de columna de mujeres postmenopaúsica de una población del entorno de Barcelona. Las mujeres con genotipo GG o GA del polimorfismo Aro1 (-913 G/A) tienen una menor DMO lumbar que aquellas con genotipo AA.
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