DESARROLLO DE SISTEMAS EMBRIOGÉNICOS EN OLMO Y CASTAÑO

El objetivo general del trabajo fue la inducción de sistemas embriogénicos en olmo y en castaño. En el olmo, la inducción se logró en embriones cigóticos de dos especies U.minor y U.glabra. El estado de desarrollo de los embriones cigóticos tuvo una influencia determinante en la inducción de los embriones somáticos puesto que la respuesta embriogénica se produce entre la 2ª y 6ª semana postantesis cuando el embrión cigótico está en los estados de globular, torpedo y cotiledonar. La mayor respuesta embriogénica se obtiene en la 5ª y 6ª semana postantesis cuando los embriones cigóticos están en la etapa de expansión cotiledonar previamente a la acumulación masiva de proteínas. La presencia de 2,4-D fue necesaria durante la 2ª, 3ª y 4ª semana postantesis dado que todos los explantos reactivos fueron cultivados en medio adicionado con 2,4-D, mientras que en la 5ª y 6ª semana postantesis también se consiguió respuesta embriogénico se subcultivaron en medio sumplementado con 0,1 mg/L de BA. Los embriones somáticos son generalmente pequeños, de color verde y aspecto filamentoso, apareciendo individualizados o en grupos en los bordes del callo embriogénico. Una vez asegurada la producción de embriones somáticos se aplicaron diferentes tratamientos de germinación y desarrollo de planta completa donde se evaluó el efecto del soporte físico del medio (papel o agar), el efecto de la presencia de citoquininas (BA y TDZ), y el efecto de la presencia de GA3. De los diferentes tratamientos estudiados, se concluyó que los porcentajes de desarrollo de planta eran bajos, siendo el medio líquido adicionado con 0,05 mg/L de BA y en soporte de papel el tratamiento que obtiene los mejores resultados (11%). En castaño, la inducción de embriones somáticos se logró en hojas obtenidas a partir de brotes de castaño cultivados in vitro mediante la multiplicación de yemas axilares. El tratamiento inductor fue el medio adicionado con 1 mg/L de BA y 1 mg/L de ANA. La capacidad embriogénica se mantuvo mediante el subcultivo de callo embriogénico y la inducción de embriogénesis secundaria en medio sumplementado con 0,1 mg/L de BA y 0,1 mg/L de ANA. Para la maduración y germinación de los embriones somáticos se evaluó el efecto del carbón activo y el efecto osmótico causado por distintas concentraciones de sacarosa, maltosa y sorbitol, siendo el tratamiento con maltosa 3% seguido del almacenamiento en frío durante dos meses el que obtuvo los mejores porcentajes de germinación y desarrollo de planta completa.